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• 1、酵母菌破碎方法

酵母菌破碎方法

1、具体步骤如下：采用低渗条件处理酵母菌细胞，使细胞内外渗透压相差不大，避免胞壁破裂。通过离心或过滤等方法将酵母细胞分离出来。对分离出来的酵母细胞进行机械破碎，可以使用高速离心、均质器或超高压等方法。对破碎后的细胞进行离心，在低渗条件下去除细胞壁和组织残留物。

2、需要。在酵母菌超声破碎实验中，必须要加入其它的成分才能进行细胞裂解，操作如下：用酵母细胞裂解液重悬酵母菌。加酚－氯仿稀释。加玻璃珠促进分解。振荡半小时。加入乙醇使细胞沉淀。电转大肠杆菌，细胞破裂。

3、①酸碱水解法破壁。在酵母菌体中添加酸或碱后加水分解法，常用的酸、碱为盐酸、硫酸、NaOH等，这种方法价格低廉，氨基酸收率高，但是水解后的产品微量营养成份损失大，口味差，色泽不好，特别是对于食品的安全要求越来越高的今天，这种方法逐渐淘汰。② 机械破坏法。

4、高剪切均质机主要是由于了转子高速运转所产生的高速线速度，还有频率的机械的效应，伴随着强劲的动能，让组织或细胞可以在定子、转子之间非常狭窄的空隙之中受到了非常的强烈的机械还有液力的剪切、液层的摩擦、离心的挤压、撞击的撕裂还有湍流等多种综合性的效果，造成细胞破碎。

5、酵母菌适用于高压匀浆破碎技术 植物叶片适用于撞击破碎法。红血球细胞适用于渗透压冲击破碎法。动物内脏适用于低温玻璃化破碎法。

6、本方法采用蜗牛酶处理去除酿酒酵母细胞壁。去壁后的酿酒酵母细胞用SDS溶液处理，使细胞破裂，并使蛋白质变性，释放基因组DNA，再利用乙酸钾溶液低温处理，使基因组DNA充分复性，溶解于水，最终通过乙醇沉淀获得基因组DNA。这一方法避免使用酚和氯仿等有机溶剂，操作更为简单，安全。

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